首页  >  专题文章  >  文章正文
shRNA表达克隆

p53抑制肿瘤生长的新机制

Jul 15, 2008 No Comments

 

 

p53抑制肿瘤生长的新机制

 

       p53网络通过调节转录,控制着多个与肿瘤抑制相关的重要通路。Moshe Oren研究小组、

       Joshua Mendell小组以及Gregory Hannon和Michele Cleary的小组分别发表文章,论述了p53的某些功能很有可能是通过miRNA的转录活性所介导的。

       三个研究小组都对细胞内在p53有表达和没有p53表达的情况下miRNA的表达水平进行了比较。Hannon、Cleary等人对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)进行了研究,发现miRNA miR-34a、miR-34b及miR-34c的表达水平在有p53表达时有所提高。Oren的小组与Mendell的小组分别对H1299肺癌细胞及HCT116结肠癌细胞进行了研究,证实了miR-34a的表达是由p53调控的。

       那么,miR-34a是否就是p53的直接靶标呢?上述的三个研究小组都不约而同地做出相同的推设,在mir-34a的结构内存在着一个p53结合位点。为证实这一设想,三个小组都进行了ChIP实验,结果发现,被激活的p53,无论是在HCT116细胞内,还是在野生型MEFs内,都会与mir-34a的启动子相结合,这一结果与之前发表的ChIP的实验数据是吻合的。此外,三个小组也都发现,在p53表达时,萤光素酶报告因子会被mir-34a启动子诱导表达;而当启动子上p53结合位点内出现突变时,这种表达则被抑制。Hannon、Cleary等人还经实验证实,mir-34b及mir-34c也同样是p53的直接转录靶标。

       在文章中三个小组还指出,遗传物质的损伤是导致mirR-34a的p53依赖性上调的原因。这在各种小鼠组织和肿瘤细胞株中都得到了证实。Oren等人还进行了相应的活体试验,发现野生型小鼠在经过全身紫外线照射的诱导后,会出现肺部组织内miR-34a的表达,但Trp53-/- 型小鼠却并未出现miR-34a的诱导表达。癌基因的活化同样可以诱导p53表达。Hannon和Cleary等人采用肝细胞癌小鼠模型进行研究。小鼠的肝脏细胞表达癌基因Hras以及可诱导的以Trp53为靶标的shRNA。对小鼠模型的研究显示,再活化的p53可以诱导miR-34a的表达,表明miR-34a在体内受到p53的调控以及癌基因活化的影响而得到表达。

       p53活化往往最终引起细胞凋亡或生长停滞。Hannon、Cleary等人发现,miR-34a的异位表达会诱导细胞周期停滞,他们在人初级成纤维细胞以及四个肿瘤细胞株内观察到了这一现象。参与控制细胞周期的基因在mir-34转染肿瘤细胞内被特异性下调,表明了p53可能是通过诱导miR-34a来抑制这些基因的。另外两个研究小组则发现,依赖于p53的miR-34a表达可导致细胞凋亡的增加。Oren等人通过在H1299细胞株及MCF7乳腺癌细胞内异位表达miR-34a,发现了虽然并不明显却具有重要意义的现象――细胞凋亡的增加。此外,如果抑制内源性miR-34a在U20S(TP53+/+)骨肉瘤细胞中的表达,则并不会发生p53依赖性的依托泊甙(etoposide)诱导的细胞凋亡。Mendell小组则发现,miR-34a在HCT116(TP53+/+)中异位表达,可以有效诱导p53依赖性细胞凋亡的发生。对HCT116细胞的研究发现,由miR-34a调控的基因富集于与细胞周期和凋亡等功能有关的位点。

       Heiko Hermeking等人也发表了类似的研究结果。他们在文中指出,在发生DNA损伤时,p53可上调miR-34a,导致细胞周期停滞于G1期乃至细胞的凋亡,此种现象可见于各种癌细胞株。

       综上,上述各研究小组阐明了p53发挥肿瘤抑制功能的信号网络中的一个崭新部分。人类的mir-34a位于1号染色体短臂的3区6带(1p36),在癌细胞的染色体内,这一区域往往缺失。Mendell等人还发现mir-34a在胰腺癌细胞株内往往缺失。这些研究结果都表明,miR-34a以及可能存在的其它miR-34家族成员促进了肿瘤的发生。

原文检索:Nature Reviews Cancer

筱玥/编译

专题文章
No Responses to “p53抑制肿瘤生长的新机制”

Leave a Reply


8 − = six